如何測定青稞秸桿中蛋白質含量

　　我國年產秸桿達5億噸，其中除少部分秸桿用作牛羊等反芻動物飼料或還田作肥料外大部分秸桿被焚燒、廢棄既造成了資源的巨大浪費也對環(huán)境產生污染。青稞（HordeumVulgerL.var.nudumHook.f）在植物分類學上屬于禾本科小麥族大麥屬于大麥變種之一，在其他產區(qū)也稱米大麥、米麥、裸麥。主要分布在我國西藏、四川、云南、甘肅、青海等地。青稞秸桿中含有許多有營養(yǎng)物質如：氨基酸、微量元素、β—葡聚糖等，是自然界存在的巨大的可再生資源，為充分利用這一營養(yǎng)的可再生資源，本文對其秸桿中蛋白質的含量進行測定。蛋白質是生命的物質基礎，是構成生物體細胞的重要成分，是生物體發(fā)育及修補的原料，一切有生命的活體都含有不同類型的蛋白質。人及動物只能從食品得到蛋白質及其分解產物，來構成自身的蛋白質，故蛋白質是人體及動物重要的營養(yǎng)物質，也是食品中重要的營養(yǎng)指標。其具有糖類和脂肪不可代替的作用，是動物生長發(fā)育所必要的營養(yǎng)元素之一,是氨基酸以肽鍵相結合形成的、極其復雜的高分子化合物，是生物體主要的含氮物質。飼料是否合格，粗蛋白含量多少是一項重要指標。下面就用飼料中粗蛋白含量的常規(guī)方法—凱氏氮法測定其蛋白質的含量。

　　儀器及試劑：儀器為藥物粉碎機、分析天平、凱氏定氮儀（包括凱氏定氮蒸餾裝置和消化爐）、凱氏燒瓶。試劑為濃硫酸（AR級）；50%氫氧化鈉溶液；硫酸鉀；硫酸銅；0.1mol/L鹽酸標準溶液；甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑。本文我們采用GB/T5009.5—2003標準法來測定蛋白質含量。

　　實驗過程：將成熟后的枯黃的莖稈粉碎過篩后備用。去試樣0.500～2.000g準確至0.0002g，放入凱氏燒杯中，加入10g無水硫酸鉀0.5g硫酸銅和20ml濃硫酸。和2粒玻璃珠，將凱氏燒杯置于電爐上加熱，開始小火，代樣品焦化，泡沫消失后，再火力直至呈透明的藍綠色，然后再繼續(xù)加熱，約2h；去出凱氏燒瓶加入約200ml蒸餾水，連接定氮蒸餾裝置，將餾出液出口的冷凝管下端插入盛有50ml含數滴甲基紅的01.mol/L標液的三角燒瓶中，在凱氏燒瓶內加入少許沸石緩緩加入80ml50%氫氧化鈉溶液，立即連接好定氮球，檢查整個定氮裝置是否漏氣，用直接火源加熱蒸餾，蒸餾至凱氏燒瓶內殘渣三分之一時，打開定氮球與凱氏燒瓶的塞口，停止加熱；1）用0.1000mol/LHCl標液進行滴定，移取樣品至錐形瓶中用0.1000mol/LHCl標液進行滴定，直至標準溶液由藍綠色變成灰紅色為終點。此時消耗鹽酸的量記為V2；2）空白實驗取與消化樣品時同樣的量的硫酸銅、硫酸鉀、濃硫酸，按上述方法進行消化、定容到100ml，的空白消化液，取同量空白消化液進行蒸餾，用指示劑滴定至紅色消失為終點。此時消耗鹽酸的量記為V1。

　　結果計算：總氮量（%）=C*（V2-V1）÷1000×14.1/w；注C-鹽酸的摩爾溶液；V1-空白滴定消耗標準液的量（ml）；V2-樣品滴定消耗標準酸液的量（ml）；w-樣品的質量；14.1-氮的摩爾質量。蛋白質（%）=總氮量%*K；K-氨轉換為蛋白質的系數取5.7。

　　結論：從我們的的實驗結果發(fā)現，這批青稞秸稈蛋白質含量較低，平均為1.482，與作為飼料時蛋白質含量在2-8%之間還有一定的差距。因此直接將青稞秸稈作為飼料是不合理的，因為其蛋白質含量低、質地粗硬，適口性差且不易消化和吸收，但是秸稈中含有70%的碳水化合物和植物光合作用所積累的一半能量，且分布廣泛，競爭性用途少，開發(fā)利用潛力很大。